近期，“阿斯巴甜致癌”爭議引起廣泛關(guān)注。國際癌癥研究機(jī)構(gòu)、聯(lián)合國糧農(nóng)組織/世界衛(wèi)生組織食品添加劑聯(lián)合專家委員會(huì)近日發(fā)布報(bào)告，將阿斯巴甜歸為“可能對人類致癌”（2B類致癌物）之列。

阿斯巴甜是國際食品法典委員會(huì)（CAC）及中國、美國、歐盟等批準(zhǔn)合法使用的食品添加劑。CAC批準(zhǔn)阿斯巴甜可用于冷凍飲品、口香糖、糖果、焙烤食品、水產(chǎn)品、調(diào)味品、碳酸飲料等，規(guī)定最大使用量為0.3g/kg——10.0g/kg。

基于標(biāo)準(zhǔn)要求，可使用悟空K2025高效液相色譜儀測定阿斯巴甜含量。

與阿斯巴甜同屬人工合成的二肽類甜味劑的阿力甜，也是人們常用的甜味劑。阿斯巴甜的甜度可達(dá)蔗糖的200倍，阿力甜可達(dá)蔗糖甜度的2000倍。

此實(shí)驗(yàn)，我們用高效液相色譜法，使用悟空K2025高效液相色譜儀測定飲料中兩者的含量。

試樣中的阿斯巴甜、阿力甜在200 nm處有紫外吸收，經(jīng)高效液相色譜測定，外標(biāo)法定量。

色譜柱：C18色譜柱，4.6×250 mm，5 μm或者相當(dāng)?shù)纳V柱；

流動(dòng)相：乙腈 - 水（20+80）；

流速：0.8 mL/min；

進(jìn)樣量：20 μL；

柱溫：30℃；

檢測器及波長：紫外-可見光檢測器，檢測波長為200 nm。

按照色譜條件進(jìn)行采集，混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（阿斯巴甜和阿力甜濃度均為5 μg/mL）的色譜圖如圖1所示，積分結(jié)果如表1所示。

圖1混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（濃度均為5 μg/mL）的色譜圖

表1 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（濃度均為5 μg/mL）色譜圖積分結(jié)果

由表1中數(shù)據(jù)可知，阿斯巴甜的理論塔板數(shù)為12959，拖尾因子為1.18；阿力甜的理論塔板數(shù)為12977，拖尾因子為1.08。

將混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（濃度均為5 μg/mL）連續(xù)進(jìn)樣7針，疊加的色譜圖如圖2所示，結(jié)果見表2。

圖2 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（濃度均為5μg/mL）連續(xù)進(jìn)樣7針疊加的色譜圖

表2 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（濃度均為5μg/mL）連續(xù)進(jìn)樣7針重復(fù)性數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

由表2中數(shù)據(jù)可知，混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（濃度均為5 μg/mL）連續(xù)進(jìn)樣7針重復(fù)性測試，阿斯巴甜保留時(shí)間的RSD為0.088%，峰面積的RSD為0.146%，阿力甜保留時(shí)間的RSD為0.085%，峰面積的RSD為0.173%，均具有良好的定性定量重復(fù)性。

校準(zhǔn)曲線

按照色譜條件進(jìn)行采集，將混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液上機(jī)測定，混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液疊加的色譜圖如圖3所示。

圖3 混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液疊加色譜圖

阿斯巴甜、阿力甜在測定濃度范圍內(nèi)均呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，確定系數(shù)R2均在0.9999以上。

含量測定

按照步驟對飲料樣品進(jìn)行處理，并進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)。空白溶液的色譜圖、樣品的色譜圖及樣品加標(biāo)的色譜圖如圖4~圖6所示。

圖4空白的色譜圖

圖5 樣品的色譜圖

圖6 樣品加標(biāo)的色譜圖

經(jīng)計(jì)算，樣品中未檢出阿斯巴甜及阿力甜，加標(biāo)回收率分別為102.6%和98.6%。